發(fā)布時(shí)間: 2021-04-19 點(diǎn)擊次數: 3774次
B27無(wú)血清培養基的基本配方:
基本成分為基礎培養基及添加組分兩大部分。用于生物制藥和疫苗生產(chǎn)的細胞在體外培養時(shí),多數呈貼壁生長(cháng)或兼性貼壁生長(cháng);而當其在無(wú)血清、無(wú)蛋白培養基中生長(cháng)時(shí),由于缺乏血清中的各種粘附貼壁因子如纖粘連蛋白、層粘連蛋白、膠原、玻表粘連蛋白,細胞往往以懸浮形式生長(cháng)。
B27無(wú)血清培養基的優(yōu)點(diǎn):
1)避免血清不同批次間的質(zhì)量差異,提高細胞培養實(shí)驗結果的一致性。
2)避免血清對細胞的毒性作用和血清源性污染。
3)避免血清組分對實(shí)驗研究的影響。
4)有利于體外培養細胞的分化。
5)可提高目的蛋白的表達量并使產(chǎn)品易于分離純化。
6)組分穩定,可大量生產(chǎn)。
7)不含有絲分裂原抑制劑,可以促進(jìn)細胞增殖。
B27無(wú)血清培養基的使用方法:
血清仍是動(dòng)物細胞培養中基本的的添加物,尤其是在原代培養或者細胞生長(cháng)狀況不良時(shí),常常會(huì )先使用有血清的培養液進(jìn)行培養,待細胞生長(cháng)旺盛以后,再換成無(wú)血清培養液。細胞轉入培養基培養要有一個(gè)適應過(guò)程,一般要逐步降低血清濃度,從10%減少到5%,3%,1%,直至無(wú)血清培養。在降低過(guò)程中要注意觀(guān)察細胞形態(tài)是否發(fā)生變化,是否有部分細胞死亡,存活細胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。在實(shí)驗后這些細胞一般不再繼續保留,很少有細胞能夠長(cháng)期培養于無(wú)血清培養基而不發(fā)生改變的。
細胞轉入無(wú)血清培養之前,要留有種子細胞,種子細胞按常規培養于含血清的培養基中,以保證細胞的特性不發(fā)生變化。