SPL-34396儲樣板，PP，96孔，0.4ml，圓底，非滅菌，透明說(shuō)明

細胞培養培養板的操作步驟如下：

　　1.加樣品：將標本稀釋液100ul(或2滴)加到包被板內(預留陰陽(yáng)性及空白對照2-5孔)，將待檢血清用PBS或生理鹽水按1：20稀釋后取10ul加入反應孔內。

　　2.加對照：加入陰性對照1-3孔，陽(yáng)性對照1孔，各100ul對照血清?？瞻讓φ?孔空置。

　　3.溫育：將反應板震蕩使樣品混勻后，置37℃溫箱或水浴反應20分鐘。

　　4.洗板：用蒸餾水將濃縮洗滌液15ml稀釋至300ml。(1)手洗：將反應板孔內容物傾出，將洗滌液注滿(mǎn)反應孔，放置30秒鐘后用力甩去，如此重復5次后拍干。(2)機洗：5次，每孔注入洗滌液200ul或注滿(mǎn)，停留30秒鐘后吸盡拍干。

　　5.加酶標工作液：每孔加入100ul(或2滴)酶標工作液，置37℃溫箱反應20分鐘后，洗板5次，洗板操作同步驟4。

　　6.顯色和終止反應：將底物A、B液各50ul(或1滴)加到反應孔內，37℃避光顯色10分鐘。每孔加入終止液50ul(或1滴)混勻終止反應。

　　結果判定

　　1.酶標儀設定波長(cháng)450nm，先用空白調零，然后測定各孔OD值;如果選用雙波長(cháng)測定，不必設置空白對照孔。

　　2.當陰性對照平均OD值小于0.08，陽(yáng)性對照(pc)OD值大于0.30時(shí)，說(shuō)明試劑盒有效且實(shí)驗操作正確，否則應當重復試驗。

　　3.臨界值(CUT—OFF VALUE)=0.15+陰性對照平均(NC)OD值(當陰性平均OD值小于0.05時(shí)，按0.05計算;當陰性平均OD值大于或等于等于0.05時(shí)按實(shí)際值計算)。

　　4.標本OD值≤臨界值為陰性，標本OD值>臨界值為陽(yáng)性。

　　常用不同培養板的孔底面積及推薦加液量：不同孔板所加培養液的液面都不宜太深，一般在2-3mm范圍，結合不同孔的底面積就可算出各培養孔的適宜加液量。若加液量過(guò)多會(huì )影響氣體(氧氣)交換，而且在搬動(dòng)過(guò)程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實(shí)驗的目的不同靈活掌握。