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Gibco液體培養基的配置方法和操作步驟說(shuō)明

發(fā)布時(shí)間: 2022-09-24  點(diǎn)擊次數: 2124次
   Gibco液體培養基的配置方法:
  1、配料:配方換算→在容器中加入少量水→按照配方稱(chēng)取各種藥品→加足所需水量。
 
  2、溶解:
  淀粉溶解:少量冷水調成糊狀
  加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95~97℃,且需要邊
  加熱邊攪拌以防止燒焦。
 
  3、調pH:用1N的鹽酸或的1NNaOH把培養基調節到所要求的值。
 
  4、過(guò)濾:濾紙或棉花進(jìn)行過(guò)濾。
 
  5、分裝:一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
 
  6、包扎:分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時(shí)水份進(jìn)入把棉塞弄濕。
 
  7、滅菌:按配方上要求的溫度、壓力進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營(yíng)養成分會(huì )被破壞,培養基中的糖、氨基酸會(huì )使培養基的顏色變深。
 
  8、擺斜面:滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著(zhù)擺放,使其凝固成為一個(gè)斜面,約占試管長(cháng)度的1/2。
 
  9、貯存:培養基在30℃下放置一天,無(wú)污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用。
 
  Gibco液體培養基的操作步驟:
  1、準確稱(chēng)量試劑:根據不同的菌類(lèi)和用途,選擇適宜的培養基,培養基所需試劑必須純凈。
 
  2、校正ph值:將稱(chēng)量好的培養基各種成分放入容器內,標記劃線(xiàn),加熱溶解,補充水分,測定酸堿度。
 
  3、過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養基倒入其中過(guò)濾至透明。
 
  4、分裝:將過(guò)濾后的培養基分裝于中試管或三角瓶?jì)?,塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備?/div>
 
  5、培養基的,常用高壓蒸汽法。一般微生物的營(yíng)養細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽才能達到的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽比干熱法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
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