發(fā)布時(shí)間： 2017-09-18 點(diǎn)擊次數(shù)： 3419次
海克隆胎牛血清的使用所產(chǎn)生的常見(jiàn)問(wèn)題
由于血清營(yíng)養(yǎng)豐富，貯存條件特殊，因此在貯存和使用過(guò)程中容易產(chǎn)生以下問(wèn)題：
1、改變培養(yǎng)液的pH值
海克隆胎牛血清的pH理論值為7.0～8.0，培養(yǎng)基在加入規(guī)定量的碳酸氫鈉后（即達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的滲透壓），再加入10％的?？寺√ヅＱ澹话銜?huì)使培養(yǎng)液的pH值發(fā)生改變。因此在使用過(guò)程中應(yīng)注意pH的變化，如有必要可用1mol/L NaOH或1mol/L HCl調(diào)pH到所需值。
2、由于?？寺√ヅＱ?/strong>的營(yíng)養(yǎng)成分豐富，非常適合細(xì)菌、真菌和支原體等生長(zhǎng)。?？寺√ヅＱ宕蟛糠植捎檬止し盅b，因此容易把微生物帶入而使得血清被污染。使用前如果沒(méi)有及時(shí)發(fā)現(xiàn)，將會(huì)把污染物帶入正在培養(yǎng)的細(xì)胞中，而使得細(xì)胞不能正常生長(zhǎng)。
3、?？寺√ヅＱ?/strong>在貯存解凍過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生沉淀，這是由于?？寺√ヅＱ逯泻写罅恐鞍?、纖維蛋白及多肽類物質(zhì)，在-15℃冷凍保存解凍后就會(huì)自然形成沉淀，隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng)，沉淀量會(huì)增加。因此在融化血清時(shí)一般應(yīng)先在4℃放置使之解凍，然后放在室溫使血清*融化，以避免沉淀的增加。添加海克隆胎牛血清時(shí)應(yīng)避免把沉淀加入培養(yǎng)液，否則由于沉淀的存在會(huì)使得所培養(yǎng)的細(xì)胞產(chǎn)生大量黑點(diǎn)，或者細(xì)胞表面將會(huì)覆蓋一層油狀物質(zhì)，影響細(xì)胞的正常生長(zhǎng)。為減少?？寺√ヅＱ宓膿p失，可以把有沉淀的血清收集起來(lái)進(jìn)行離心處理，將上清液加入培養(yǎng)液使用（一般不建議采用過(guò)濾的方法除去沉淀，因?yàn)槌恋頃?huì)堵塞濾膜而無(wú)法過(guò)濾）。
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